基因表达载体的目的基因与运载体结合
1、将目的基因与运载体结合的过程，实际上是不同来源的DNA重新组合的过程。如果以质粒作为运载体，首先要用一定的限制酶切割质粒，使质粒出现一个缺口，露出黏性末端。
2、基因表达载体的构建，即目的基因和运载体结合，是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。其构建目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。
3、将基因与载体的重组的混合物导入活细胞，使其进行表达，如果得到了此基因表达的产物，则表示两者已经结合；使用基因探针。
4、形成相同的粘性末端，再用DNA链接酶使目的基因和运载体相连，通过标记基因筛选出需要的目的基因和运载体的结合体，可以用CaCl2处理细胞，增加细胞的通透性，使其进入细胞，最终在细胞内表达。
目的基因与运载体结合形成重组dna分子为什么不是dna分子杂交原理
因为PCR体系中包含有dNTP，水，buffer，模板，引物，酶。dNTP不是DNA片段，只是一个一个单独的碱基，你的意思估计是两个单链DNA分子互补配对。
DNA分子杂交是利用不同的DNA中碱基的互被配对原则，使不同的DNA中各自的单链成为一个新的DNA分子，而目的基因与运载体结合形成重组DNA分子利用的是基因重组的原理。
DNA分子杂交的基础是，具有互补碱基序列的DNA分子，可以通过碱基对之间形成氢键等，形成稳定的双链区。
能将目的基因与载体的链接方法说的详细一点吗?谢谢!
1、DNA连接酶连接的是脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，这样，目的基因就与载体连接在一起了。
2、设计引物，引物两端带有设计好的酶切位点，找个有目的基因的细胞，提了ran，然后把目的片段p出来，然后跑胶，试剂盒回收目的片段。把载体和目的片段用同样的双酶切，再跑胶，回收切开的载体和目的片段，连接吧。
3、将目的基因与运载体结合的过程，实际上是不同来源的DNA重新组合的过程。如果以质粒作为运载体，首先要用一定的限制酶切割质粒，使质粒出现一个缺口，露出黏性末端。
