hoechst染色原理33342 hoechst33342染色步骤

Hochest33258,Hochest33342有何区别

区别如下:Hoechst 33342,也称bisBenzimide H 33342或HOE 33342。分子式为:C27H28N6O·3HCl·3H2O,分子量为6199。Hoechst 33258,也称bisBenzimide H 33258或HOE 33258。

Hochest33258,Hochest33342两种染料都是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。所以hochest染色对细胞活性影响不大。其中33342比33258毒性低。

此外,由于全部细胞均经固定,因此不能区别死细胞和活细胞。Hoechst-PI染色则可弥补上述不足。Hoechst 33258 可被活细胞摄取,与DNA结合在紫外光下呈蓝色荧光。继而PI使死细胞着染产生红色荧光。

hoechst33342和其他染料一起染色的时候顺序

根据这些特性,用Hoechst 33342结合PI染料对凋亡细胞进行双染色,就可在流式细胞仪上将正常细胞、凋亡细胞和坏死细胞区别开来。

常用的荧光染料:丫啶橙、 PI 、DAPI、Hoechst33258 和Hoechst3334EB等Hoechst 3334Hoechst 3325 DAPI三种染料与DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区。紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光。

另外,PI不能穿透细胞膜而被排斥在活细胞外,但是可以穿过破损的细胞膜而对核染色。利用以上特性,PI可作为细胞活力分析的荧光探针之一。

DAPI溶液是半通透性的,不固定的话,细胞染色时间得长,染料进入细胞会比较少,所以建议是固定。DAPI 可以透过完整的细胞膜,它可以用于活细胞和固定细胞的染色。

待Hoechst 染色完成后,用D-Hanks 冲洗除净残余的Hoechst 染料接下来,再加入用PI 染液,使其终质量浓度为10 μg/mL,4 ℃下避光反应15 min,染色完成也用D-Hanks冲净残余染液最后,将染好的细胞置于倒置荧光显微镜下观察、拍照。

Hoechst 33342 比 33258更容易透过细胞膜,所以常用33342染死/活细胞,33258染死细胞。而有些种类的细胞由于可以更有效地将进入细胞的Hoechst染料主动转运到细胞外,所以染色会弱一点,这是一般也选择Hoechst 33342。

凋亡的形态观测

形态学观察方法 HE染色、光镜观察:凋亡细胞呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。

细胞凋亡的形态学检测 根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。 1 光学显微镜和倒置显微镜 (1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体。

形态学特征 细胞凋亡的变化是多阶段的,细胞凋亡往往涉及单个细胞,即便是一小部分细胞也是非同步发生的。

细胞凋亡的形态学检测根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。

该类研究方法包括细胞形态观察、DNA断裂检测、蛋白质检测。细胞形态观察:通过显微镜观察细胞形态的变化来初步判断细胞是否发生凋亡。DNA断裂检测:通过凝胶电泳等方法检测DNA的断裂程度。

hochest染色对细胞活性有影响吗

染色会对细胞产生的影响:染色会加深细胞或者细胞器的颜色,导致细胞失去生命活性。在需要观察的细胞或细胞器颜色较深时可以不用染色,如紫色洋葱表皮细胞、叶绿体等。

细胞一经固定就不再是活细胞,而且细胞固定过程对细胞膜的通透性也有影响。因此发展了用“细胞活性”鉴定染料染色的流式细胞仪检测方法。

另有很多核酸染料在多色染色系统中是非常有用的复染剂,可作为背景对照,标记细胞核使细胞内结构的空间关系一目了然。

染色会对细胞产生的影响主要是能使细胞结更清晰。染色可以使细胞的结构显示得更加清楚,但是染色剂对活细胞的生物活性往往会有很大影响,有时甚至是致死的。

也可用于固定细胞或组织的细胞核染色,或可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。好像两者区别不大,但我看细胞凋亡或活性检测的试剂盒里面,常用的是Hoechst 33258。

horchest染色试剂盒哪个好

1、Hoechst 33342 比 33258更容易透过细胞膜,所以常用33342染死/活细胞,33258染死细胞。而有些种类的细胞由于可以更有效地将进入细胞的Hoechst染料主动转运到细胞外,所以染色会弱一点,这是一般也选择Hoechst 33342。

2、上海爱必信多重荧光免疫组化染色试剂盒,采用TSA技术,基于酪酰胺的信号放大技术能够检测用传统方法无法检出的低丰度靶标,且无需担心抗体交叉反应,以及一抗二抗种属匹配问题,大大减少了实验设计时不同种属抗体选择匹配的限制。

3、好不好用,要用过才知道啊。试剂盒说明:苏木精-伊红染色法 ( Hematoxylin-Eosin staining ),简称HE染色法 ,是病理学常规制片中最基本的染色方法。

4、不可以。化学试剂不能航空托运的,而染色液试剂盒是属于化学试剂,因此是不能空运的,空运化学试剂容易发生不好的反应。