annexinvpi双染原理 annexin vpi双染色法

细胞凋亡检测---检测细胞凋亡的方法有哪些,有什么意义嘛?求告知...

1、由于这是一种凋亡早期的活细胞检测(悬浮细胞和贴壁细胞都适用),可与DNA染料或别的晚期检测方法相结合来标记凋亡的发展阶段。美国著名生物试剂公司CLONTECH和Invitrogen公司分别开发了多种标记的Annexin V产品,简便快速,10分钟就可完成检测。

2、细胞形态观察:通过显微镜观察细胞形态的变化来初步判断细胞是否发生凋亡。DNA断裂检测:通过凝胶电泳等方法检测DNA的断裂程度。蛋白质检测:通过Western blot等技术检测凋亡相关蛋白的表达水平。

3、流式检测细胞凋亡的原理 Annexin V和PI双染法是流式检测细胞凋亡的经典方法 ,它是基于凋亡的早期细胞膜上的磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine, PS)从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面这一原理来实现的(如下图3)。

4、细胞凋亡的检测方法众多,流式细胞仪检测凋亡,是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此,具有其它方法无可比拟的优越性。为您介绍流式在检测凋亡方面的应用。

最常用的细胞凋亡检测方法是什么?

HE染色、光镜观察:凋亡细胞呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有出芽现象。丫啶橙染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。

而流式细胞术是非常重要的检测细胞凋亡的方法,不仅可以定性,也可以定量。流式细胞术检测细胞凋亡的方法也有很多,其中最重要是annexinV/PI双染色法。

该类研究方法包括细胞形态观察、DNA断裂检测、蛋白质检测。细胞形态观察:通过显微镜观察细胞形态的变化来初步判断细胞是否发生凋亡。DNA断裂检测:通过凝胶电泳等方法检测DNA的断裂程度。

TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling)是检测细胞凋亡的经典方法。

除此之外,还提供生物素偶联的Annexin V,可通过常用的酶联显色反应来检测。另外,MACS公司将磁珠包被Annexin V,可采用磁分选方法筛选凋亡细胞。

检测凋亡的方法有很多种:做western blot。

流式图四个象限怎么看凋亡

这四个缩写分别表示细胞凋亡流式图中十字坐标划分的四个区域,UL是上左(为碎片及损伤细胞),UR是上右(为晚期凋亡及死亡细胞),LL是下左(为阴性对照的正常细胞),LR是下右(为早期凋亡细胞)。

左下为正常细胞,左上为坏死细胞;右上为晚期凋亡细胞,右下为早期凋亡细胞。检测CD4和CD8,应该还要同时染色CD 先选中CD3阳性的细胞(T细胞),把T细胞在CD4/CD8的散点图上再显示,可以分为四个象限。

有资料说:1代表坏死细胞,2代表晚期凋亡细胞,4代表早期凋亡细胞。我就不明白了,既然是凋亡,就算是晚期,细胞膜也会破坏?还有的认为,2象限代表晚期凋亡和继发性坏死的细胞。

左上/P2-Q1:坏死细胞;右上/P2-Q2:晚期凋亡细胞;右下/P2-Q3:早期凋亡;左下/P2-Q4:未发生凋亡的细胞。胞凋亡(apoptosis)指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡。

左上象限为坏死细胞,左下象限为正常细胞,右上象限为早期凋亡细胞,右下象限为晚期凋亡细胞。

如下图所示:细胞可以分为4个象限:图4:4个象限的细胞分布图 举例:如常用于研究药物或者基因等对细胞凋亡的影响。