shrna是什么原理
1、shRNA是short hairpin RNA 的缩写。翻译为“短发夹RNA”。shRNA包括两个短反向重复序列，中间由一茎环（loop）序列分隔的，组成发夹结构，几个基因有一段核苷酸序列重叠在一起。
2、基因研究中，敲除基因，研究该基因的功能是最常用的套路。一般 ShRNA 可通过 RNA 干扰来抑制基因的表达， 是基因研究中必不可少的环节。下面就主要围绕设计 ShRNA 引物序列，手把手教你构建 ShRNA 质粒，轻松敲基因。
3、siRNA序列是与mRNA目的序列完全互补结合的，所以是降解；当不完全互补时才是抑制翻译，miRNA大部分是这样的。从而在1oxP 动物的一定发育阶段和一定组织细胞中实现对特定基因进行遗传修饰之目的的基因敲除技术。
4、转入质粒的原理：质粒上连的片段转录后能够自身互补形成双链（shRNA），在细胞内被细胞自己剪切成siRNA。两种转染方法在功能上是一致的。但是siRNA转染以后发挥作用的时间较短，用于短期抑制试验（一般维持一周以内）。
shRNA真核表达载体构建的原装进口shRNA表达系统
此shRNA数据库亦有一套原装进口的shRNA表达系统相匹配，针对每个基因的一套shRNA序列均已构建至相应的shRNA表达载体上，可直接使用，整套产品均为原装进口。
构建的shRNA真核表达载体或者mirshRNA真核表达载体，由于载体上均带有LR同源重组臂，所以这些载体均可作为YRBIO腺病毒包装系统中的穿梭载体使用。
第1版的TRC shRNA文库包括35，000 shRNA克隆（其中人类基因有5300个，小鼠基因有2200个），其它新构建的克隆每个季度会陆续公布。
shrna敲低原理如下：shrna主要是由于互补配对诱发同源mrna特异性降解。将shrna构建到plko.1的质粒中，将质粒转染进细胞，在细胞质中，质粒就是转录出一段与目的基因互补的单链rna。
shRNA包括两个短反向重复序列，中间由一茎环（loop）序列分隔的，组成发夹结构，几个基因有一段核苷酸序列重叠在一起。重叠基因中不仅有编码序列也有调控序列，大基因内包含小基因。
慢病毒载体的介绍
慢病毒载体（lentivirus vector， LV）是一类来源于逆转录病毒的载体， 慢病毒之所以是称为慢病毒，是因为感染的主要临床特点是在出现典型的临床症状以前，经历较长的潜伏期，之后缓慢发病。gag、pol和env。
慢病毒载体可以将外源基因或外源的shRNA有效地整合到宿主染色体上，从而达到持久性表达目的序列的效果。
慢病毒载体是指以人类免疫缺陷病毒-1 (H IV-1) 来源的一种病毒载体，慢病毒载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息，是慢病毒载体系统的主要组成部分。
采用慢病毒载体构建shRNA载体有什么优势?
慢病毒载体可以将外源基因或外源的shRNA有效地整合到宿主染色体上，从而达到持久性表达目的序列的效果。
siRNA 基因沉默子进入培养细胞，可快速有效地短暂地降低靶基因的表达。使用嘌呤酶素选择 shRNA 或 shRNA 慢病毒颗粒是一种达到稳定基因沉默的方法。
具有：优点：（1）原装进口产品，未做任何改动。（2）装载shRNA序列的真核表达载体，同时也是慢病毒包装系统中的穿梭载体，可用以包装慢病毒。缺点：（1）载体上没有荧光标记。（2）载体骨架稍微有点大，有7K左右。
慢病毒载体（Lentiviral vector， LVs）是在HIV-1病毒基础上改造而成的病毒载体系统，它能高效的将目的基因（蛋白质编码序列、shRNA或gRNA）导入动物和人的原代细胞或细胞系。
