叶绿素a的测定
1、进行叶绿素a的测定时，所需的仪器设备有：分光光度计、真空泵、离心机、乙酸纤维滤膜(孔径0.45um)、抽滤器、组织研磨器或其他细胞破碎器、碳酸镁粉末、90%丙酮。
2、利用分光光度法测定叶绿素含量是依据Lambert-Beer定律，数学表达式为A=Kbc。其中，A为吸光度；K为吸光系数；b为溶液的厚度；c为溶液浓度。叶绿素a，b的丙酮溶液在可见光范围内的最大吸收峰分别在663nm和645nm处。
3、叶绿素含量的测定方法主要有紫外分光光度法、荧光分析法、活体叶绿素仪法、光声光谱法和高效液相色谱法。不过目前应用最为广泛的还是分光光度法。
影响准确测定叶绿素含量的因素有哪些
1、此外，植物的光合作用受到抑制也可能是叶绿素含量偏低的原因之一。这可能是由于植物受到环境因素的影响，如温度、湿度、光照等。
2、影响叶绿素的因素：光、温度、矿质元素。光、酸、碱、氧、氧化剂等都会使其分解。光是影响叶绿素合成主要条件，温度影响酶促反应。矿质元素，氮镁是其组成成分，铁锰铜锌在合成过程有催化或其他作用。
3、另外，叶绿素的含量是植物生长状态的一个反映，一些环境因素如干旱、盐渍、低温、大气污染、元素缺乏都可以影响叶绿素的含量与组成，并因之影响植物的光合速率。
4、）比色皿架及比色皿在使用中的正确到位问题。有些使用者对这个问题不够重视，因操作不当造成偶然误差，严重影响分析结果。首先，应保证比色皿不倾斜放置。
光电比色法测叶绿素含量原理
叶绿素含量的测定方法：分光光度法。分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析的方法。它具有灵敏度高、操作简便、快速等优点，是生物化学实验中最常用的实验方法。
因为spad值跟植物叶绿素含量是相关的，所以只要测量植物中叶绿素的含量，就能知道spad值，叶绿素是吸收光线的主要物质，不同波长的光线，叶片的吸收量不同，于是通过两种波长范围内的透光系数来确定叶片当前叶绿素的相对数量。
测定原理 根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收，利用分光光度计在某一特定波长测定其吸光度，即可用公式计算出提取液中各色素的含量。
目的 掌握叶绿素a、b 含量测定的基本原理和方法。 叶绿素含量的测定叶绿素的含量与植物光合作用及氮素营养有密切的关系，在科学施肥、育种 及植物病理研究上常有测定的需要。
