SDS-PAGE样品上样前为什么要加热
1、通过加热和SDS可以使蛋白质变性，多亚基的蛋白质也将解离为单亚基。同时还原剂可以切断蛋白质中的任何一个二硫键（使二硫键还原）。经过这样处理的样品中的肽链都是处于无二硫键连接的，分离的状态。
2、而SDS-PAGE仅根据蛋白质亚基分子量的不同就可以分开蛋白质。
3、加热是SDS-PAGE测量蛋白质复合物分子量的必须步骤。通过加热，促进蛋白形成椭圆结构，椭圆的短轴一致，长轴依据蛋白的分子量而不同，在电泳中表现为不同的泳动速率，与蛋白标准对照，从而达到测定分子量的目的。
4、至于为什么没煮过的更接近真实分子量，那是因为你用的上样buffer是非还原的，连Marker的迁移率也不是只跟分子量相关了。要想准确反映分子量，还是要按标准的SDS-PAGE操作，使用还原上样buffer，煮沸样品。
PAGE的原理是什么?
page凝胶电泳实验过程及原理如下：凝胶电泳的原理比较简单。当一种分子被放置在电场当中时，它们就会以一定的速度移向适当的电极，这种电泳分子在电场作用下的迁移速度，叫做电泳的迁移率。
PAGE)是由丙烯酰胺单体和交联剂甲叉双丙烯酰胺在催化作用下形成的三维网状结构物质。在不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳中，凝胶的制作是分层进行的，因此凝胶不仅有分子筛效应，还具有浓缩效应。
．聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺单体（以后简称单体）在水溶液中聚合而成的亲水性高聚物，是一种透明而不溶于水并有韧性的凝胶。
SDS-PAGE是十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术，用于分离蛋白质和寡核苷酸。聚丙烯酰胺凝胶由单体丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺聚合而成。
Native-PAGE原理 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)是在不加入SDS 疏基乙醇等变性剂的条件下， 对保持活性的蛋白质进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，常用于同工酶的鉴定和提纯。
当蛋白质的电荷性质。尿素page胶的原理为当蛋白质的电荷性质与其质量明显相关时，小分子蛋白质在SDSPAGE中的迁移，尿素，是由碳、氮、氧、氢组成的有机化合物，是一种白色晶体。最简单的有机化合物之一。
SDS-PAGE和分子筛过滤层析测定蛋白质分子量在原理和方法上有何不同...
1、是根据蛋白质的电荷不同即酸碱性质不同分离蛋白质混合物的方法。电泳：在外电场的作用下，带点颗粒将向着与其电性相反的电极移动，这种现象称为电泳。电泳技术可用于氨基酸、肽、蛋白质和核苷酸等生物分子的分析分离和制备。
2、分子筛层析，又称凝胶层析、排阻凝胶层析、凝胶过滤，利用凝胶把物质按分子大小不同进行分离的 一种方法。
3、原理不同的测定方法 测定结果都是不同的。其实没有哪种方法是金标准（除过氨基酸测序后。。），不同方法互为补充而已。结果不对应是正常的。PG-PAGE 测定结果相对更为准确，可作为补充。
4、SDS-PAGE是变性胶，蛋白质需要变性，使得分离度只和蛋白分子量大小有关。凝胶层析则是非变性分离。
5、普通PAGE是网状结构，具有分子筛效应，是一种非变性聚丙烯酰胺凝胶，蛋白质在电泳中保持完整的状态，蛋白在其中依三种因素分开：蛋白大小，形状和电荷。 而SDS-PAGE仅根据蛋白分子量亚基的不同而分离蛋白。
求生化大神帮忙,急!!!蛋白质分子量用NativePAGE测定,分子量是200KD,在...
1、凝胶过滤和Native-PAGE测定分子量时蛋白并不变性，说明活性状态下蛋白是200kD，SDS-PAGE时由于SDS的存在，蛋白都会变性，打开成为肽链。但SDS并不能打开二硫键，因为二硫键是共价键。所以在二硫键存在的情况下蛋白是100kD。
2、在混合样品中各蛋白质组分的迁移率主要取决于分子大小和形状以及所带电荷量。
3、未知蛋白质在相同条件下进行电泳，根据它的电泳迁移率即可在标准曲线上求得分子量。
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)原理是什么?
1、聚丙烯酰胺凝胶电泳原理聚丙烯酰胺凝胶为网状结构，具有分子筛效应。它有两种形式：非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（Native-PAGE）和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。
2、SDS-PAGE是十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术，用于分离蛋白质和寡核苷酸。聚丙烯酰胺凝胶由单体丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺聚合而成。
3、作用原理聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构，具有分子筛效应，它有两种形式，一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶，蛋白质在电泳中保持完整的状态，蛋白在其中依三种因素分开：蛋白大小，形状和电荷。
4、聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacryamide gel electropHoresis， PAGE)是由丙烯酰胺单体和交联剂甲叉双丙烯酰胺在催化作用下形成的三维网状结构物质。
5、作用原理：聚丙烯酰胺凝胶为网状结构，具有分子筛效应。
